免疫技术检测动物疫病简便高效
□顾建柱张利刚
“几种动物重要疾病分子免疫学检测技术研究及试剂盒研制”项目研究进出境动物分子学疫病检测的新方法,已经在全国检验检疫系统5个口岸以及天津畜牧总站进行了实际应用。应用结果显示,利用该项目形成的检测方法可以有效提高针对进出口动物重要疾病检测的工作效率、准确率。
2012年底,天津滨海新区科技进步奖揭晓,在获奖名单中,由天津检验检疫局申报的“几种动物重要疾病分子免疫学检测技术研究及试剂盒研制”项目荣获该奖项的二等奖。奖项评审专家认为,该项目实现了针对几种动物重要疾病检测方法的优化,并成功开发确立了相应试剂盒的制备方法,研究成果对丰富我国对几种动物重要疾病检测手段、提高相应检测工作效率、保护我国畜牧业健康发展都有着积极意义。
动物检疫监管人员监督进境种牛下船
感染病死率极高
马泰勒氏虫病、驽巴贝斯虫病属于动物血液原虫病,主要感染马和牛,是养马和养牛业主要防疫的疾病之一。1996年元月,我国甘肃省礼县曾发生驽巴贝斯虫病,该病波及14个乡(镇),有3246匹(头)马、牛发病,致1884匹(头)死亡,给当地农户和养殖业造成巨大经济损失。
羊痒病是一种由痒病朊病毒引起,在成年绵羊和山羊身上慢性进行性的致死性神经系统疾病。该病潜伏期长,无法进行血清诊断和免疫预防,病死率极高,一旦爆发,会对养羊业造成巨大经济损失,是国际间绵羊贸易重点防疫疾病之一。
我国是一个农牧业大国。近年来,为了促进国内产业发展,我国鼓励企业引进优质种牛、种羊等动物。在全国各进境动物口岸中,天津口岸是一个业务量相对较大的口岸。据统计,2012年天津口岸仅进境种牛15批、35966头。
对进境动物实施疫病检测是各国检验检疫部门的工作职责,同时也成为越来越受到各国关注的世界性问题。近年在世界各地暴发的疯牛病、羊痒病、禽流感等动物疾病,不仅给本地及相关贸易国畜牧业造成了巨大的经济损失,同时也给人们的健康和生活带来了很大的负面影响。
羊耳采取血样
检测水平待提升
面对如此大量的进境动物,天津局动植食中心担负着对这些动物是否健康安全、是否存在危害国内消费者身体健康和畜牧业安全因素的检测诊断工作。
近年来,天津局动植食中心先后从国外引进较为先进的仪器设备和方法技术,确保了进境动物疾病检测工作的顺利开展。但在该中心科研人员的心里一直有一个夙愿:尽早研制出适应我国动物进境工作、属于我国自主创新的检测方法,摆脱国外技术束缚,促进我国相关领域检测水平整体提升。
2009年3月,在天津局动植食中心主任赵祥平的带领下,中心动物检疫实验室的科研团队开始了“几种动物重要疾病分子免疫学检测技术研究及试剂盒研制”项目的科研攻关。项目团队通过广泛收集相关资料、探访求教该领域的专家学者、实地考察国内实验室、反复进行实验方法比对论证,终于摸索建立了一套针对猪、牛、羊、马等世界流行传染性疫病的快速检测方法。项目主要包含“动物血液原虫病免疫印迹杂交检测方法的研究”、“传染性羊痒病的研究”和“检疫性动物疫病快速检测试剂盒的研发”三部分内容。
实验室人员对采集的动物血清进行分样
显示出三大亮点
项目形成了几个亮点成果:
亮点一:国内首次建立马泰勒氏虫病、驽巴贝斯虫病免疫印迹杂交检测方法。
项目人员利用体外培养虫体技术获得了马泰勒氏虫病、驽巴贝斯虫病免疫印迹杂交的抗原,进而建立了这两种常见病的免疫印迹杂交检测方法,并确立了这两种病的免疫印迹杂交诊断试剂盒的制备方法。这种检测方法敏感度高、特异性强,在检验检疫业务中能够快速、准确、可靠地运用。
亮点二:首次针对传染性羊痒病开展抗性基因型鉴别诊断方面的研究,填补了我国在这一研究领域的空白。
项目针对传染性羊痒病潜伏期长,不能进行血清学诊断和免疫预防,病死率极高的特点,建立起一种利用荧光定量PCR扩增反应对传染性羊痒病抗性基因筛选的平台。利用此平台,可以迅速检测出传染性羊痒病基因,能够从根本上杜绝此病的传入。同时,该研究也为我国动物及其产品的出口提供了有力的技术支持,有助于我国相关行业或企业应对国外技术性贸易措施。
亮点三:建立检测牛白血病、牛传染性鼻气管炎和马焦虫病抗体的间接ELISA方法,并确立针对这三种病的ELISA检测试剂盒的制备方法,填补了国内技术空白。
项目人员通过重组蛋白技术研究,分别确定了牛传染性鼻气管炎、牛白血病和马焦虫病等检疫性动物疫病的快速检测试剂盒制备方法。“检测人员只要直接将分离的动物血清放入试剂盒内,就可以快速掌握该动物是否存在疾病病原,操作简便,效率也高。”此方法成功取代了传统的ELISA方法,打破了目前我国对牛传染性鼻气管炎、牛白血病和马焦虫病等疾病检测仍需要依靠进口试剂盒来完成检测任务的现状,也为国内养殖及进出境牛、马等动物疾病的检疫、诊断和流行病学调查等工作提供了良好的借鉴。
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“几种动物重要疾病分子免疫学检测技术研究及试剂盒研制”项目是由天津检验检疫局主持,由该局动植物与食品检测中心具体完成的,课题针对8种常见的进境动物重要疾病,如疯牛病、羊痒病等的检测技术进行了研究改善,形成了一系列研究成果,为我国进境动物疾病检测工作提供了更为高效、便利的方法,部分研究成果填补了国内相关技术领域空白。
项目研究的成功为我国进境动物重要疾病的快速检测、动物快速通关、保障国内农牧业安全、破除国外技术封锁及技术性贸易措施都提供了较高价值的操作依据或技术参考。
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